磺胺类药物在猪肉中的残留检测——样品前处理改善方法

　　1、合作实验单位：浙江省兽药饲料监察所、浙江省畜产品质量安全检测中心

　　2、依照方法：国家农业行业标准 NY5029—2001

　　3、样品：猪肉

　　4、国标规定的提取和纯化过程如下：

　　称取组织样品5g(精确到0.1g)，加入乙腈25ml， 无水硫酸钠少许(血清除外)，匀浆后，以3000r/min 的速度离心5min。分离后的残渣再用25ml 乙腈处理，振荡10min 后，以3000r/min 的速度离心5min。合并两次的上清液，加入正己烷30ml，振荡10min 后，以3000r/min 的速度离心5min，取下层液体，加入正丙醇10ml，50 摄氏度下减压干燥(1) ，残留物用95%乙腈3ml 溶解，过Sep Pak 氧化铝B 柱。用95%乙腈5ml 过柱，不收集，再用70%乙腈10ml 洗脱后，洗脱液中加入5ml 正丙醇，50C 下减压干燥(2)后，残留物用2.0ml流动相溶解，所制样液用高效液相色谱仪进行检测。

　　5、目前使用的仪器：

　　BUCHI 旋转蒸发仪R-200+VACCUMBRAND 真空隔膜泵 2 套

　　6、实验过程中碰到的问题：

　　1) 处理的样品数量大，平均每天处理60 个样品，每次20～30ml 样品量;每天同时用

　　2 套旋转蒸发仪处理，2 个人平均每人每天处理30 次，每次蒸发大概需要8～10min(不含中间转换时间)。操作过程繁琐、时间长。

　　2) 无法进行真空度控制，样品在蒸发过程中容易暴沸。并且溶液来不及冷凝全部被带到真空泵中。

　　7、解决方案：

　　使用的仪器：

　　BUCHI 12 位快速蒸发仪(Multivapor12)+BUCHI 真空隔膜泵(V-700)带真空控制器(V-855)

　　选择的实验：

　　因为第二步减压干燥是含有30%的水较难蒸馏，所以我们直接选择了第二步来做实验。

　　蒸发的溶液：样品+10ml 70%乙腈(30%水)+5ml 正丙醇，大概20ml

　　处理的样品数量：一次12 个

　　操作过程：

　　1) 仪器连接、准备完毕，Multivapor12 预热到50C。

　　2) 将 12 个样品分别倒入对应编号的12 根样品管。

　　3) 将 12 根样品管放入仪器内，盖好真空盖，开始旋转。

　　4) 在真空控制器 V-855 上设置减压蒸馏的程序：常压快速到250mbar,3min 内到80mbar 维持10min,再降到40mbar(水在50C 时被蒸发出来的真空度为40mbar—参考V-855 内的溶剂数据库).

　　5) 按“开始”键后，真空泵开始按照程序抽真空。

　　6) 样品蒸到尽干，实验结束操作时间：整个操作时间25min 左右。

　　问题：在真空度40mbar 蒸馏水时，乙腈已被完全蒸出并冷凝到回收瓶内，但是乙腈在40mbar的真空度时会再次蒸发、暴沸，影响水的蒸馏速度。

　　解决办法：1)、在接收瓶下放一盛有冰块的杯子，提供更好的冷凝。

　　2)、在蒸完乙腈后，停止蒸馏，将接收瓶倒空。然后直接将真空度降到40mbar蒸馏水。

　　结论：使用BUCHI 的12 位快速干燥仪只需要25min 就可以同时处理完12 个样品，而且解决

　　了在操作过程中不易控制的暴沸问题，并将大部分溶剂冷凝回收。

　　简介BUCHI 快速干燥仪MULTIVAPOR

　　来源：作为旋转蒸发仪的供应商，BUCHI 公司早在几年前，就根据客户的需求开始研发一款可以同时蒸发多个样品的仪器。经过几年的实验和测试，BUCHI 公司于2008 年初推出了这款同时处理6 或12 个样品的快速干燥仪。

　　仪器原理：快速干燥仪的原理如同旋转蒸发仪，仪器本身可以提供旋转和水浴夹套加热功能，并且通过与真空泵和真空控制器的连接，可以进行减压蒸馏。

　　仪器优势：

　　1、可以同时处理 6(最大有效容积120ml)或

　　12(最大有效容积30ml)个样品

　　2、每个样品都是独立密封的，不会有交叉污染

　　3、采用透明的玻璃圆筒，可以看到蒸馏的情况

　　4、可以使用通用的试管、离心管和 PSE 管等

　　5、即可以购买独立成套仪器，也可以和现有的旋转蒸发仪配置联用。

　　6、节省人力成本