百迪羊水细胞培养基100ml
- 品名： 百迪羊水细胞培养基100ml
- 型号： S205-100
- 产品详情
- 规格参数
产品信息
| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | 【适用仪器】 显微镜、二氧化碳细胞培养箱、离心机。 【样本要求】 新鲜采集的羊水细胞或绒毛膜细胞效果最佳。 【检验方法】 1. 在无菌条件下抽取妊娠16-21周羊水约20-30ml，平均注入2-3支15ml一次性离心管中。 2. 将含有羊水的离心管以400g 离心10min。 3. 去上清液，每管底约留0.5ml，制成细胞悬液，再加入约3-5ml 羊水细胞培养基，充分混 匀，转移至T25 培养瓶中，置于5% CO2 37℃温箱进行培养。 4. 一般5 天后镜下观察，可见成纤维样或上皮细胞生长，当细胞生长旺盛，在贴壁细胞层 的背景上出现圆形细胞时，视情况（有较好的梭形细胞克隆）可更换上羊水细胞培养基， 继续培养24-48 小时。 5. 终止培养：加入秋水酰胺溶液，使终浓度为0.1μg/ml，4-6（3-4 小时）小时左右进行 细胞学处理，胰酶消化后收集细胞悬液，1000rpm离心10min去上清。 6. 低渗：加入约2ml低渗溶液混匀（0.075M KCI），37℃水浴3-5min。 7. 预固定：加入1.5ml新鲜、预冷的固定液（冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液），37℃ 水浴5min，1800rpm离心10min去上清。 8. 固定：缓慢加入2ml新鲜、预冷的固定液，37℃水浴10min，1500rpm离心10min去上 清。 9. 再次固定：加入2ml新鲜、预冷的固定液，37℃水浴10min，离心1500rpm离心10min 去上清。 10. 根据管底细胞量适当加入几滴新鲜固定液。 11. 制片：将细胞液滴在冰冻玻片上，每片1-2 滴。 12. 烤片：75℃烤箱烘烤3 小时（37℃或60℃孵箱中过夜或80℃ 3小时）。 13. 显带处理：取胰酶分带溶液（0.25%）5ml，加入45ml生理盐水染色缸中（使终浓度为 0.025%），用1N HCl或1N NaOH调节pH=7.0，置于37℃预温，将烤好的玻片标本放 入胰酶分带溶液中处理60s左右（轻轻摇动）。 14. 取出玻片标本，在37℃预温的生理盐水中漂洗玻片。 15. 将玻片标本放入37℃预温的吉姆萨工作液中，染色5-10分钟。 16. 自来水冲洗，自然晾干后，分析中期染色体并解释结果。 【阳性判断值或者参考区间】 细胞倍增指数大于2 【检验结果的解释】 1. 固定液每次使用必须新鲜配制，否则将会形成酯类，形成背景较为明显，从而影响制片 效果。 2. 细胞培养时间、加入秋水酰胺的量以及低渗操作时间等因素都会影响样品制备效果，需 要根据实际样本及实验条件进行适当调整。 3. 如果标本来自于妊娠第9个月的患者，则细胞沉淀可能较大但活细胞含量较少，因此需要 较大的接种密度（少于正常量的培养基）。 【检验方法的局限性】 仅用于培养羊水细胞、绒毛膜细胞。 |
| 注意事项 | 1. 羊水细胞培养基短期内可放4-8℃保存，若长期储存，应放-20℃保存，不可反复冻融。 2. 本产品只用于体外诊断，操作过程应避免污染；操作人员在检验时应做好防护，预防疾 病传播。 3. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 4. 溶液应为澄清，如有沉淀物，严禁使用。 5. 禁止使用超出规定有效期的产品。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 | 培养基应在-20℃避光储存，有效期为24个月。 |
产品详情
主要组成成分：基础培养基、胎牛血清、胰岛素、转铁蛋白、生长因子、纯化水。
将人羊水细胞或采集的绒毛样品在羊水细胞培养基中短暂培养后，进行后续核型分析或其他 产前基因检测。
暂无内容...
