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百迪鸡胚胎成纤维细胞 1×106cells/T25培养瓶

品名: 百迪鸡胚胎成纤维细胞 1×106cells/T25培养瓶
品牌: 百迪生物
型号: C5763
  • 产品详情
  • 规格参数

产品概述

来源鸡胚胎
形态贴壁、成纤维细胞样
培养89%DMEM+10%FBS+1%P/S 39℃ 5%CO2
传代0.25%胰蛋白酶消化1-2min,比例1:2
产品简介鸡胚胎成纤维细胞(Chicken embryonic fibroblasts) UMNSAH/DF-1 起源于10 日龄的ELL-0鸡胚胎,是一株自发永生化的鸡细胞株。分离培养的DF-1细胞可传代至衰老,在衰老过程中通过离心浓缩保持细胞培养在30%~60%的汇合度,通过软琼脂克隆验证永生化与转化。该细胞作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的工具,常用于动物病毒研究、疫苗研制、癌症研究等诸多领域的研究。
收货指南1. T25细胞瓶到货后处理方案:
(1) 验货:培养瓶上标签、培养瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
(2) 处置:75%酒精对培养瓶消毒后,放入39℃,5% CO2的培养箱静置培养2-4小时后,进行显微观察、拍照,作为售后维权依据;
(3) 注意:贴壁细胞在运输过程中发生细胞脱落,这是正常现象,静置后可恢复贴壁。
2. 冻存管到货后处理方案:
(1) 验货:包装的标签、包装内是否有干冰、冻存管完好性;
(2) 处置:尽快复苏(见培养方法)或程序降温后转移至液氮中保存。
培养方法1.培养基:
89% DMEM 培养基;10% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-链霉素(P/S)。
2. 复苏:
(1)解冻:用镊子将冻存管浸于37 ℃水浴;反复摇晃,迅速完成解冻;
(2)离心:喷洒75%酒精消毒后,在无菌环境下,打开冻存瓶,用移液器将细胞连同冻存液移至含1 mL完全培养基的10 mL离心管中,室温1000 rpm离心3-5 min,细胞沉于离心管底部;
(3)培养:将上清液轻轻弃去,加2 mL完全培养基,轻柔悬起细胞,然后将所有细胞悬液移至含有3 mL完全培养基的T25培养瓶中,于39 ℃,5% CO2培养箱中培养;
(4)观察:每日观察细胞生长状态(培养基颜色、细胞贴壁情况、形态与密度等)并拍照。
3. 传代:
细胞密度达80%-90%开始传代
(1)清洗:无菌下吸出培养基,用37 ℃预热的PBS清洗一次;
(2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,转动培养瓶令其浸润所有细胞,室温(或 37 ℃)消化,显微镜下观察到细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回超净台,轻敲几下培养瓶后加1 mL完全培养基终止消化;
(3)离心:用移液器轻柔吹匀后然后将悬液转移至10 mL离心管中,在1000 rpm离心3-5 min;
(4)培养:无菌下弃上清液,加1 mL完全培养基悬起细胞并移至T25培养瓶中;按1∶2比例添加完全培养基,用移液器轻柔吹匀后,分装至培养瓶中,于39 ℃,5% CO2培养箱中培养。
生物安全等级1请在无菌环境中操作,避免污染;为了保护细胞的稳定性,细胞传代次数不宜过多;为了结果的可靠性,实验前请确认细胞状态良好;严格遵守生物安全操作规程。
免责声明本产品仅用于科研目的,不得用于临床诊断、治疗等用途。用户应遵循国家和地区的法律法规,自行承担使用本产品所产生的一切风险和责任。请在使用前仔细阅读本说明书,并按照指导操作。如有任何疑问或需要进一步信息,请与我们联系。

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