白鲨Biosharp BL779A Fura-2 AM (钙离子荧光探针, 2mM)
- 品名： 白鲨Biosharp BL779A Fura-2 AM (钙离子荧光探针, 2mM)
- 型号： BL779A
- 产品详情
- 规格参数
产品简介：
Fura-2 AM是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一，其在进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2，Fura-2特异性地结合Ca2+并发出荧光，结合Ca2+后的最大激发波长从结合前的380 nm向340 nm偏移，其发射荧光强度与结合Ca2+的浓度存在定量关系。一般用340nm和380nm波长激发Fura-2，通过使用与两种激发对应的荧光强度比率来计算细胞内的钙离子浓度，这种比率测量方法可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。
本产品是配制于无水DMSO中的储存液，浓度为2mM。
使用方法（仅供参考）：
一、试剂准备：
1．配制Pluronic F-127母液：100mg Pluronic F-127粉末中加入0.5ml DMSO配制成20%(w/v) Pluronic F-127母液。溶解时需要在40-50℃加热20-30min。室温保存，如果有结晶析出，重新加热即可溶解，不影响使用。
二、荧光标记：
1．Fura-2 AM工作液的配制：用HBSS稀释Fura-2 AM溶液，制备1-5µM的Fura-2 AM工作液。可以加入Pluronic F-127防止 Fura-2 AM在缓冲液中聚合并能帮助其进入细胞，Pluronic F-127的工作浓度是0.02%（1:1000 稀释母液）。
注：工作液现配现用；具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。为了避免过度加载造成细胞毒性，建议在取得有效结果的基
础上尽量使用最低探针浓度。
2．对于待检测的培养细胞，除去培养基，使用缓冲液洗涤细胞3次。
3．将Fura-2 AM工作液加入细胞，加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养15-60 min，然后除去Fura-2 AM工作液。
注：如果是首次实验不能确定孵育条件，建议先尝试 37℃孵育30分钟，观察荧光效果。如果细胞死亡较多，则适当缩短时间；
如果荧光强度太弱，则适当延长时间。
4．用缓冲液洗涤细胞3次，以充分去除残留的Fura-2 AM工作液。
5．加入缓冲液覆盖细胞，37℃孵育约20-30 min，以确保AM体在细胞内的完全去酯化作用。
6．激光共聚焦显微镜等荧光检测仪器观察和检测细胞。
注意事项：
1、本产品在4ºC、冰浴等较低温度下可能会凝固而粘在管底、管壁或管盖，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。
2、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件：
-20℃避光保存，半年有效，避免反复冻融。
