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TaKaRa BcaBEST™ RNA2步法反转录PCR扩增试剂盒

品名: TaKaRa BcaBEST™ RNA2步法反转录PCR扩增试剂盒
品牌: TaKaRa
型号: RR023A
  • 产品详情
  • 规格参数
  • 商品名称:BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1

  • 商品编号:SPU2021050500

  • 上架时间:2022-01-06






■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1
BcaBEST Polymerase (22 U/μl)50 μlRNase Inhibitor (40 U/μl)25 μlRandom 9 mers (50 μM)50 μlOligo dT Primer (50 μM)50 μlRNase Free dH2O1 mlBca-Optimized Taq (5 U/μl)25 μl2 × Bca lst Buffer1.25 ml × 2 支5 × Bca 2nd Buffer800 μldNTP Mixture (各10 mM)50 μlMgSO4 (25 mM)500 μlControl F-1 Primer*2 (20 μM)25 μlControl R-1 Primer*3 (20 μM)25 μlPositive Control RNA (2 × 105 copies/μl)25 μl  *1 反转录反应10 μl,PCR反应体系50 μl,可使用100次。*2 Positive Control RNA用上游引物。*3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂,即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA,然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃,所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。 
■ 各种引物的序列
引物名称各引物序列Random 9 mers  5′-NNNNNNNNN-3′Oligo dT Primer  包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,没有M13 Primer M4区域。Control F-1 Primer  5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′Control R-1 Primer  5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 试剂盒的原理

BcaBEST RNA PCR的原理图

■ 试剂盒特点
RNA模板  适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效)扩增片段大小   5 kb以下反转录酶   BcaBEST Polymerase (最适温度65℃)DNA聚合酶   Bca-Optimized TaqRNase Inhibitor   必须使用 (试剂盒中含有)合成cDNA第一条链的引物  Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特异性下游PCR Primer 可供选择操 作   在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)


BcaBESTRNAPCRKitVer.1.1
品牌CodeNo.产品名称包装量
TakaraRR023ABcaBESTRNAPCRKitVer.1.1100次
TakaraRR023B(A×2)BcaBESTRNAPCRKitVer.1.1200次


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