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■ 制品内容 (Code No.: RR064A: 50 μl反应×100次) |
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2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ*1840 μl × 3 支TaKaRa Ex Taq HS (5 U/ μl)100 μlPrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ*2100 μlRNase Free dH2O1.25 m l × 2 支ROX Reference Dye (50X)*3100 μlROX Reference Dye II (50X)*3100 μl *1 内含dNTP Mixture,Mg2+等。*2 内含RNase Inhibitor。*3 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye(50X),7500 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II(50X),Thermal Cycler Dice Real Time System和Smart Cycler System、LightCycler等Real Time PCR扩增仪不必使用。 |
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■ 制品说明 |
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本制品是采用探针法进行Real Time One Step RT-PCR的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时监测,大大提高了检测灵敏度,并省略了PCR反应后的电泳步骤,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和具有高扩增效率和高扩增特异性的TaKaRa Ex Taq HS,能进行稳定高效的Real Time One Step RT-PCR反应。 ■ 保存-20℃。 ■ 试剂盒特长1. 通过Real Time One Step RT-PCR反应,可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA 进行分析。2. PCR用DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR 反应,再与Takara特别开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率,高扩增灵敏度,高扩增特异性之特点。3. One Step RT-PCR Buffer III是一种2X浓度的Premix Type试剂,操作简单,能有效避免污染。 ■ 使用注意1. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。2. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。3. 2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ 融解后如有不溶物请充分混合。配制Real Time One Step RT-PCR反应液时应避免强光照射。4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。5. 本制品只能使用特异性反转录引物,不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等进行反转录反应。 |
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