岛津黄曲霉毒素总量(AFT)免疫亲和柱
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免疫亲和柱利用抗原抗体特异性可逆结合的原理,将毒素杭体与凝胶共价结合,然后填充柱子。将样品提取溶液过 免疫亲和柱,与抗体分子有特异性结合的黄曲霉毒素被固定,而非目标化合物则沿柱流出,再用甲醇将黄曲霉毒素洗脱,根据待测物分子荧光特性, 用高效液相色谱或专用定量荧光速测仪进行定量检测。
黄曲霉毒素 赫曲毒素 玉米赤霉烯酮 呕吐毒素
Aflatoxin B1 Ochratoxin A Zear alenone Deoxynivalenol
一,样品制备
参考《GB 5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉凿素B族和G族的测定》。
1, 均质
准确称取20.0g粉碎的样品,加入100ml 70%甲醇 水(体积比)混匀,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min;
2, 提取
提取液用玻璃纤维滤纸过滤或5000r/min离心Smin,取10ml滤液加入20ml水稀释,混匀;
3, 过滤
用快速定性滤纸或玻璃微纤维滤纸或定量滤纸过滤,收集滤液,取15ml
注意:对千样品提取液(pH<6或pH>8)的样品, 需调节pH至中性, 并用玻璃微纤维滤纸/定量滤纸过滤; 对千浑浊难过滤的样品, 可用离心机离心使其分层
二, 样品净化
注意:整个纯化过程尽量不要让柱子液体流干!
(1)取出免疫亲和层析微柱,将上方塞子取出剪断, 再插回亲和柱上
(2)将柱子与泵流操作架上的玻璃针筒连接固定,去掉亲和柱下方堵头,用15ml水或pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗涤1次,流速1.5ml/min;
(3)将处理后的溶液上样, 使 液体以1.5 ml/min的速度流出;
(4)用15ml水或pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗涤2次,流速1.5ml/min, 直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体
(5)用1ml甲醇洗脱,用样品瓶/玻璃试管接洗脱液, 流速1ml/min;
(6)脱后液体可用于检测。
*每盒产品内附产品使用说明
一,注意事项
(1)黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次氯酸钠浸泡过夜。
(2)不要使用过有效期的免疫亲和柱。
(3)免疫亲和柱应在2~8它保存,不要冷冻。
(4) 使用前,免疫亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。
(5)样本AFB1含量高千柱容量时,需适当降低上样体积。
(6)必须保证过柱的样品提取液pH在6~8之间,可用盐酸或氢氧化钠调整。
(7)称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整,建议最低不少于1
保质期
(1)4℃下保存期可长达两年;
(2)生产日期见外包装盒
测定条件 |
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